Rodrigo Castellanos es Pedro, el hijo de Elena, la panadera de San Martín y de Mario, el peluquero más famoso de Doctor Mateo. Pedro está alcanzando la adolescencia con la serie y parece que está encontrando a su primer amor en Olga.
Gonzalo Kindelán es Riqui, el técnico que ayuda a Carol en la emisora de radio de San Martín del Sella. El actor ha participado en otro de las series de Antena 3 más populares, en Física o Química.
Natalia Verbeke es Adriana Pozuelo en Doctor Mateo, la actriz que nació en Argentina y ha cursado estudios de arte dramático, de flamenco y de danza, además de ser elegida el rostro más bonito de la televisión en 1998 recibiendo el Premio Max Factor.
Gorka Otxoa es Santiago Sagredo, un doctor novato que admira profundamente al doctor Mateo y se convierte en su ayudante en la consulta de San Martín del Sella. El actor nació en San sebastián y compagina el humor con la interpretación.
Alex O'Dogherty es Alfredo en Doctor Mateo. El actor gaditano de ascendencia irlandesa, es un auténtico hombre espectáculo. Ha hecho de todo: cantante, músico, compositor, director de cortometrajes, cine y sobre todo televisión.
Lulu palomares es Carol Díaz, la locutara más cotilla de San martín del Sella. La actriz de Doctor Mateo lleva mucho años en el mundo de la interpretación, pero ha destacado durante muchos años por sus papeles en la televisión catalana.
Diego Martín es Nicolas Yubero en Doctor Mateo, el primo cocinero de Mateo que de repente ha aparecido en San Martín del Sella. El actor madrileño comenzó su carrera televisiva en Periodistas y luego fichó por la serie de Antena 3, Policias.
Ángela dejó todo lo que tenía en Bilbao, cogió su furgoneta y se plantó en Madrid en búsqueda de su sueño: convertirse en actriz. Parece que su sueño se ha hecho realidad, ya que Ángela se ha convertido en Anita, la chica más dulce de Doctor Mateo.
Javier Coll es un actor madrileño que decide dejar su trabajo como fotógrafo para hacer de figuración en películas históricas como Tajones Lejanos o Las edades de Lulú. En la actualidad es Antonio en Doctor Mateo, un personaje muy particular ya que tiene un amigo imaginario llamado Míguel con el que mantiene conversaciones.
Elió González es David Pellegrini en Doctor Mateo, el hijo de Tom que ha dejado Madrid para ayudar a su padre a superar un problema de salud, pero en San Martín se encuentra con Anita, que no le deja indiferente.
Rosario Pardo es Tia Juana en Doctor Mateo, la actriz estudió filología hispánica, pero decidió dar un vuelco a su vida formándose en danza, interpretación y mimo. Su éxito en televisión vino gracias al programa Crónicas Marcianas.
Daniel Freire es Tom Pellegrini en Doctor Mateo, el dueño de la taberna más famosa de San Martín del Sella. El actor argentino se ha ganado al público por su atractivo y su peculiar forma de ser.
Xavi Mira es Mario, el marido de Carol en Doctor Mateo y se ha convertido en el peluquero de San Martín del Sella. El actor catalán ha participado en varias series, aunque su último papel antes de Mario fue el de Félix en Física o Química.
María Esteve es Elena en Doctor Mateo. La actriz nació en el mismo país que Natalia Verbeke, Argentina. A ambas no sólo les une Doctor Mateo, sino una gran amistad que viene de hace muchos años.